zhoulili317

我在一张处理过的载玻片上贴了两张片子，这样除了节省载玻片也节省操作，刚开始下边的用抗体1：50，上边的用1：100的，染色后50的好一些，再做的时候就都用的50的，却发现同一个组织同一个浓度下边的都比上边的背景深不知道为什么?

痞子张

我考虑您是不是用微波修复的啊？、
可能就上下受热不均匀！！修复的问题！！
你用高压锅试试看啊
我个人不同意一张玻片放两张片子，我见过南方好多医院常规都是放两张片子的

那样我感觉并不节约时间，可能节约的是玻片????

shanghainese

引用:

原帖由 zhoulili317 于 2007-7-23 07:41 发表
我在一张处理过的载玻片上贴了两张片子，这样除了节省载玻片也节省操作，刚开始下边的用抗体1：50，上边的用1：100的，染色后50的好一些，再做的时候就都用的50的，却发现同一个组织同一个浓度下边的都比上边的背 ...

同意老张的说法,修复时的温度上下一定要均匀.
在一张载玻片上贴了两张片子的方法我们做了很多年,没发现您所提的问题.
不过在实验时仔细做好每一步骤是非常重要的.

zhoulili317

是微波修复，把片子平铺到可微波加热的饭盒里面做的，由于空间有限每次只能做7、8个，那么多片子怎样才能保证修复的时间程度一样呢。还有一个问题请i教我做六组每组取六个样，这就30多个我必须同时做吗，还是可以分批做，每次修复的时候把时间设成相同？此外洗的过程中都是竖着放到架子上的还有滴加二抗等之前把pbs甩一下 会不会是的两个片子浓度不一样？

shanghainese

片子放在染色缸里.
染色缸放在里微波里.

duochanghai

同时放在微波修复如果是修复液盖过玻片，应注意微波内修复过程中修复液会蒸发过少的。另外滴加二抗之前把pbs甩一下我认为浓度没有影响，请找其它原因吧注意操作过程。

kfzjn

我做免疫组化时经常用水浴锅或高压锅修复,效果都不错。一直不怎么用微波，我想问一下，用微波修复时，温度、时间、修复液的量咋控制最合适？请经常用微波的老师回答我。谢谢啦！

lijie208239

头疼呀