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请教AB-PAS染色问题-固定液,方法等

请教AB-PAS染色问题-固定液,方法等

我现在想染气管的杯状细胞,查文献说是AB-PAS染色,请问固定是用普通固定液吗?我查《病理学技术》是说用普通中性甲醛固定,但是有人说不能用含水固定液,现在按书上方法染,发现阿尔斯兰液染和SCHIFF液都是染成均一的颜色。这和固定液有关吗?另外我在书上看到SCHIFF液配好后会逐渐变无色,但是我配的液过了1天还是棕黄带红的,是不是配失败了?另外SCHIFF液要求重蒸水,是什么原因?好像配这个要求比较多。

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和固定液没有关系,10%甲醛固定就可以。雪夫氏试剂配后有时就是草**,但不带红色,染色后才能知道有没有问题。用双蒸氺,要求纯配出来才好。

[ 本帖最后由 ylzhao 于 2008-5-8 08:49 编辑 ]

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1.A/P 染色:AB—PAS染色 (阿尔辛蓝过碘酸,雪夫氏方法)
   原理:利用阿尔辛蓝与PAS共同染色,区分酸性,中性粘液物质。酸性-阿尔辛蓝(蓝色) 中性-PAS(红色)。
   步骤:1)石蜡切片脱蜡至水 蒸馏水洗1-2M
                  2)1%阿尔辛蓝醋酸水溶液3-5M
                  3)1%过碘酸氧化5-6M蒸馏水洗3-4次
         4)SHIFF液3M
                  5)复染一般用苏木素2-3M过染时可用0.5%盐酸酒精分化
         6)充分水洗返蓝
         7)逐级酒精脱水,透明,中性树胶封片
1%阿尔辛蓝醋酸溶液: 阿尔辛蓝1g 蒸馏水97ml 冰醋酸3ml ph2.5—3.0(染大肠化生的片子时ph1.0)
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