脱钙
[这个贴子最后由ylzhao在 2005/01/30 10:11am 编辑]
（一）酸性溶液脱钙法
1．硝酸-间苯三酚液：
浓硝酸10ml，间苯三酚1g，通风橱内混合。混合时会产生浓的棕黄色双硫磷烟雾。然后加10%硝酸 100ml。
骨组织块5mm厚脱钙时间12-24小时。
优点：该液脱钙速度非常快，大概是所有脱钙液中速度最快的一种脱钙液。
缺点：
（1）细胞核染色很差。
（2）如果脱钙时间太长对组织有较大的损害。
（3）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少24小时。
（4）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
2．硝酸水溶液：浓硝酸5-10ml，蒸馏水加至100ml。厚度5mm骨组织块脱钙12-24小时。
优点：
（1）硝酸水溶液是一种迅速的脱钙液。
（2）对组织损害较少，细胞核着色比福尔马林-硝酸液要好。
（3）组织可直接通过70%乙醇去除酸。
缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。
3．福尔马林-硝酸液：40%甲醛5ml，浓硝酸10ml，蒸馏水85ml。5mm厚的骨组织块脱钙时间需要1-3天。
优点：
（1）福尔马林-硝酸液是一种迅速的脱钙液。
（2）该液脱钙的组织比间苯三酚-硝酸液细胞核染色好。
（3）可作为紧急活检脱钙用。
（4）该液和5-10%硝酸水溶液一样对组织几乎没有损害。
缺点：
（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。
（2）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。
4．Perenyi’s 液：
10%硝酸4份，0.5%铬酸3份，无水乙醇3份。
5mm厚的骨组织块脱钙时间需要2-7天。
优点：
（1）该液是一种温和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。
（2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。
（3）推荐该液作为常规脱钙使用。
（4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。脱钙组织直接移到90%乙醇中。
缺点：
（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。
（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
5．Von Ebener’s液：
饱和水溶液氯化钠 50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸 8 ml。
厚度5mm骨组织块脱钙3-7天。
优点：
（1）细胞核染色相当好。
（2）不需要水洗，脱水时酸就会首先被脱出来。
缺点：使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
6．甲酸液：
甲酸 10ml，10%福尔马林盐 90ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要3-7天。
优点：
（1）脱钙同时可以对组织固定。
（2）对细胞核染色比较好。
（3）推荐用于小块组织和牙齿脱钙。
缺点：
（1）脱钙比较慢，不推荐作为常规标本脱钙使用。
（2）不推荐作为密皮质骨脱钙使用。
（3）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少18小时。
7．三氯醋酸液：
三氯醋酸5g，10%福尔马林盐95ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要5-8天。
优点：
（1）对细胞核染色好。
（2）脱钙之后不需要水洗，酸乙醇可以去除。
缺点：
（1）脱钙作用慢，仅仅推荐用作骨的细针脱钙。
（2）不推荐作为密皮质骨脱钙使用。
8．Flemming’s液：
1%铬酸 15ml，2%四氧化锇 4ml，冰醋酸 1ml。
Flemming’s液虽然是一种固定液可作为微细骨针脱钙用。液体需要新鲜配制，并在容器底部会形成沉淀。脱钙后如果直接通过乙醇可以形成不能溶解的色素。脱钙之后标本必需充分流水冲洗去除过多的铬盐。使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。用苏木精染色时细胞核受抑制。
9．AFIP甲酸-柠檬酸钠液：
A液：甲酸25ml，蒸馏水25ml。B液：枸橼酸钠（结晶）10g，蒸馏水50ml。
临用时A液和B液等量混合，每日换1次，因为柠檬酸钠可以和钙离子螯合，具有促进脱钙的作用。
10．蒋维中（Jangweizhong’s）液：
盐酸80ml。甲酸70ml，三氯化钙50g，冰醋酸25ml甲醛100ml，生理盐水900ml。
此液脱钙迅速，0.5cm厚的松质骨6-20小时就可以完成脱钙。对组织影响极小，染色效果好。配制简便，脱钙后不需要用碱性液中和。
（二）螯合脱钙剂脱钙法
EDTA是一种良好的脱钙液螯合剂，它对组织破坏极小，不产生气泡，不影响染色，如果加温至37℃，可以加快脱钙速度。
EDTA脱钙液：
乙二胺四乙酸（EDTA）5.5g，10%中性福尔马林100ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要7-21天。
优点：
（1）经EDTA脱钙的组织染色结果好。
（2）对组织的结构损害小。
（3）用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
缺点：
（1）脱钙速度相当慢，不适合常规标本脱钙使用。
（2）脱钙后组织会稍微变硬。
资料由本人整理由于水平有限难免有不妥之处仅供参考。
