左旋

我们科室胃镜组织的裂隙问题实在太严重了，改了很多条件还是没有好转，裂隙大部分都是在腺体内，也有一些是整个片子上无差别的裂，并且只有小标本有裂隙，大标本没有问题。实在没办法了，恳请各位老师帮忙分析一下是什么原因造成的，万分感谢！科室背景：坐标深圳，我们科室标本少所以是大小组织一起脱水的，固定时间24h+，脱水机是达科为的hp300，后附脱水流程，使用小孔包埋盒，浸蜡及包埋使用的石蜡熔点为58-60℃，使用薄片式的不锈钢包埋模具，切3μm，摊片46℃，捞片后不使用烤片台，直接放置在70℃烤箱烤片15min。按其他帖子分析的方法也试了温和修片、切片慢摇、蜡块少冻一会儿（试过仅冻一分钟）、改用大孔的包埋盒，包埋盒间隙增宽等效果均不理想。现在主要还是考虑脱水方面的问题了，因在切片时较多组织比较毁刀，新刀口切出来的蜡片上有组织的地方就会有明显刀痕。月标本量一千四左右，考虑成本的问题，所以我们试剂都是递推更换的，试剂及石蜡一个月左右递推换一次，最近一次更换试剂是12.7，福尔马林、75、85、第二道95、第二道无水、第三道二甲苯均是新的，一周后测试75酒精实际浓度只有六十多，更换石蜡后整个批次的蜡块都比较好切但裂隙还是有，过些天又有些组织开始有刀痕了。因成本有限，若浓度不合适我们可尽量调试浓度，但将试剂全部更换不太允许，请大家帮忙分析一下脱水时间是否合适，谢谢大家！
福尔马林：100分钟
75：50分钟
85：50分钟
95：45分钟
95：45分钟
100：45分钟
100：45分钟
二甲苯：10分钟
二甲苯：10分钟
二甲苯：20分钟
石蜡：20分钟
石蜡：30分钟
石蜡：40分钟
石蜡为64℃，其余均为常温，脱水程序原本是使用脱水机自带的，但后面根据诊断老师的建议，二甲苯的时间由30，30，30改为了10，10，20，但改动前后脱水无明显差别。

左旋

照片换成JPG的格式了，感谢丁老师指点！这里补充一点内容：我们在26号把75和85换了全新的，95和无水也有一道全新的，75-95都增加了十分钟，第二天大部分都没有裂隙了，但是试剂用了四天之后又开始出现大片的裂隙，好绝望…

dingwei

1、说明前面脱水时间不够。      2、四天之后又开始出现大片的裂隙，很正常，说明试剂浓度下降，应该更换了。     3、切片时蜡块不要太冰或者切片不能太用力。4、切片刀要快、切片不要太厚

lymphoma

1、标本取材前已固定，取材后甲醛固定30分钟足亦；2、70%甲醛-乙醇替代75%酒精90-120分钟；
3、二甲苯总计120-180分钟左右；
4、浸蜡时间总计120分钟以上，适当选用较低熔点蜡，蜡缸温度为熔点加2-3℃（深圳室温高，选用低熔点蜡易导致蜡块融合，但熔点太高导致浸蜡温度增高，使组织硬度及脆性增加）；
5、切片时冻台温度不能太低，最好是用冰块；
6、标本少，脱水液半月一换；

禾太急

大部分没有裂？还是有裂的意思？
要从切片流程及方法上找原因，我们科以前也是这样，还专门整改了。
蜡块是否冰冻温度过低？脱水梯度跨度是否过大？烤片温度如何？切片人员的心情等都有影响。。。。。。。。。

张椽椽

丁老师回复得很全面了，慢慢实验经验总结