返回首页 | 病理技术专题 | 病理资讯 | 病理图库 | 病理技术精英 | 同行交流 | 技术会诊 | 点滴经验 | 常规切片 | 特殊染色 | 分子免疫 | 细胞园地 | 电镜技术 | 收藏本站
发新话题
打印

[求助]胃镜组织产生裂隙的原因

本主题由 dingwei 于 2024-1-11 21:21 审核通过

[求助]胃镜组织产生裂隙的原因

我们科室胃镜组织的裂隙问题实在太严重了,改了很多条件还是没有好转,裂隙大部分都是在腺体内,也有一些是整个片子上无差别的裂,并且只有小标本有裂隙,大标本没有问题。实在没办法了,恳请各位老师帮忙分析一下是什么原因造成的,万分感谢!科室背景:坐标深圳,我们科室标本少所以是大小组织一起脱水的,固定时间24h+,脱水机是达科为的hp300,后附脱水流程,使用小孔包埋盒,浸蜡及包埋使用的石蜡熔点为58-60℃,使用薄片式的不锈钢包埋模具,切3μm,摊片46℃,捞片后不使用烤片台,直接放置在70℃烤箱烤片15min。按其他帖子分析的方法也试了温和修片、切片慢摇、蜡块少冻一会儿(试过仅冻一分钟)、改用大孔的包埋盒,包埋盒间隙增宽等效果均不理想。现在主要还是考虑脱水方面的问题了,因在切片时较多组织比较毁刀,新刀口切出来的蜡片上有组织的地方就会有明显刀痕。月标本量一千四左右,考虑成本的问题,所以我们试剂都是递推更换的,试剂及石蜡一个月左右递推换一次,最近一次更换试剂是12.7,福尔马林、7585、第二道95、第二道无水、第三道二甲苯均是新的,一周后测试75酒精实际浓度只有六十多,更换石蜡后整个批次的蜡块都比较好切但裂隙还是有,过些天又有些组织开始有刀痕了。因成本有限,若浓度不合适我们可尽量调试浓度,但将试剂全部更换不太允许,请大家帮忙分析一下脱水时间是否合适,谢谢大家!
福尔马林:100分钟
7550分钟
8550分钟
9545分钟
9545分钟
10045分钟
10045分钟
二甲苯:10分钟
二甲苯:10分钟
二甲苯:20分钟
石蜡:20分钟
石蜡:30分钟
石蜡:40分钟
石蜡为64℃,其余均为常温,脱水程序原本是使用脱水机自带的,但后面根据诊断老师的建议,二甲苯的时间由303030改为了101020,但改动前后脱水无明显差别。
附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件

TOP

照片换成JPG的格式了,感谢丁老师指点!这里补充一点内容:我们在26号把75和85换了全新的,95和无水也有一道全新的,75-95都增加了十分钟,第二天大部分都没有裂隙了,但是试剂用了四天之后又开始出现大片的裂隙,好绝望…
附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件

TOP

1、说明前面脱水时间不够。      2、四天之后又开始出现大片的裂隙,很正常,说明试剂浓度下降,应该更换了。     3、切片时蜡块不要太冰或者切片不能太用力。4、切片刀要快、切片不要太厚
附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

TOP

1、标本取材前已固定,取材后甲醛固定30分钟足亦;2、70%甲醛-乙醇替代75%酒精90-120分钟;
3、二甲苯总计120-180分钟左右;
4、浸蜡时间总计120分钟以上,适当选用较低熔点蜡,蜡缸温度为熔点加2-3℃(深圳室温高,选用低熔点蜡易导致蜡块融合,但熔点太高导致浸蜡温度增高,使组织硬度及脆性增加);
5、切片时冻台温度不能太低,最好是用冰块;
6、标本少,脱水液半月一换;

TOP

回复 2# 的帖子

大部分没有裂?还是有裂的意思?
要从切片流程及方法上找原因,我们科以前也是这样,还专门整改了。
蜡块是否冰冻温度过低?脱水梯度跨度是否过大?烤片温度如何?切片人员的心情等都有影响。。。。。。。。。

TOP

丁老师回复得很全面了,慢慢实验经验总结

TOP

发新话题