伊红染色不太好,该如何解决?
伊红染色不太好,该如何解决?各位大侠:
我做的是小鼠胚胎脑组织切片!
我用的伊红配方是沉淀酸化伊红Y乙醇液,但是最后封片观察发现,伊红染色特别淡,请大家帮助解决,谢谢!我的切片浸入伊红染液的上一步是在95%乙醇浸泡3分钟。下面是我染色的详细时间步骤,各位老师能否帮我修正一下。
------------------------
------------------------
二甲苯1-------------------------8 min
二甲苯2-------------------------8 min
无水乙醇------------------------2 min
95%乙醇-------------------------2 min
75%乙醇-------------------------2 min
自来水洗
苏木精浸染----------------------5——10 min Gill改良苏木素液
自来水洗
1%盐酸乙醇分化---------------数秒
自来水洗
50℃温水蓝化-------------------1 min
自来水洗
95%乙醇-------------------------3 min
伊红染色-------------------------3——10秒 沉淀酸化伊红Y乙醇液
自来水洗
脱水——透明——封固:
95%乙醇--------------------- 2秒
无水乙醇-------------------- 5秒
无水乙醇--------------------3~5秒
无水乙醇--------------------1min
二甲苯1---------------------5 min
二甲苯2---------------------5 min
中性树胶封固、晾干(制片流程结束)
封片后,我最后发现伊红染的很淡,苏木精染的还可以;
还有切片从伊红染液里出来后,要不要经过水洗这一步骤?还有我这染色步骤有没有哪地方需要改动的?