冰冻切片的固定问题
实验不顺,再次请教各位老师几个问题:
1 是否石蜡切片能做出来的,冰冻切片一定能做出来?
2 冰冻切片是否绝对不需要修复,高温,高压,也不要用修复液?
3 冰冻切片抗体的表达与固定方法关系大不大?我做的是一种大鼠心肌的蛋白多肽,用过丙酮固定,多聚甲醛蔗糖溶液固定,都没做出来。片子是一片黄。有人建议再换固定方法,但书上固定方法有30多种,不会要逐个摸索吧?同时用丙酮固定的切片,别的指标做得还可以,能否说明我的固定没问题。还是不同指标不同固定方法。那麽大鼠心肌的蛋白多肽(表达在胞浆)最好用什么方法?
多谢!!!!!