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1.你有没有用二抗的同种属的正常血清封闭切片
2.有没有内源性物质的影响,如过氧化物酶或生物素
3.有没有交叉反应,是不是一抗的浓度过大,最好尽可能在阳性的情况下稀释抗体
4.二抗是否和组织中的Ig有交叉反应,可以用待测的5%正常血清稀释二抗
5.最好先仔细阅读你的一抗产品的说明书,对抗体使用的要求,用何种抗原修复方法等
6.当然也和你的石蜡切片的切片的清洁度有关等等.
  以上供你参考,和大家交流.也许会有其他高手和专家指点给你的.