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请教丁老师和各位老师:涂片做免疫组化(SP法)要注意什么问题?用那种固定液好些?

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1、切片脱蜡至水
2、阻断内源性过氧化物酶(198毫升甲醇或水+2毫升30% H2O2)室
  温20分钟。
3、pH7.2缓冲液洗三次。
4、胰蛋白酶消化37 ℃,30分钟。(或按说明书要求:放入抗原修复液内微波修复20分钟、或电炉加热30分钟、或高压锅加帽出气后3分钟,快速冷却;或不处理)
6、滴加正常血清37 ℃,30分钟。
7、擦去多余血清,加一抗37 ℃,30分钟。,
8、pH7.2缓冲液洗三次。
9、滴加二抗,37 ℃,30分钟。
10、pH7.2缓冲液洗三次。
11、滴加ABC复合物,37 ℃,45分钟。
12、pH7.2缓冲液洗三次。
13、DAB显色3~10分钟。
14、水洗。
15、苏木素淡染,蓝化,脱水,透明,封固。

是复印丁老师的啊,呵呵
  :em18:

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