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求助：关于胚胎冰冻切片出现的问题

persev

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1# 大 中 小 发表于 2008-6-6 20:15  显示全部帖子

求助：关于胚胎冰冻切片出现的问题

我做低等生物胚胎发育的冷冻切片，胚胎较小直径约170微米，10%甲醛固定后，琼脂包埋，LEICA冰冻切片机-24

摄氏度，样品放置20min快速冷冻后切片厚10微米。结果发现圆形胚胎全部变形或破裂。


       有可能是温度低了点，样品冷冻时间长了点，但还没有尝试重新做。


       不知道各位有没有遇到过类似的情况，请求各位达人给予解决建议。


         不胜感激！！！

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persev

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2# 大 中 小 发表于 2008-6-11 15:10  显示全部帖子
谢谢LS版主建议，我的胚胎样品水分含量相当大。因为是水生动物的胚胎，这也给我的试

验带来很大的困难。样品用普通胶水固定的，应该没什么问题。不知道10微米是不是薄了点？

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persev

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3# 大 中 小 发表于 2008-6-15 23:24  显示全部帖子
谢谢LS各位提出的建议。

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persev

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4# 大 中 小 发表于 2008-6-24 10:26  显示全部帖子
我的材料是从外地取回来的，不固定肯定是不行的，取材要好几天甚至是十几天，所以必须取了材料先固定，我做的是碱性磷酸酶染色。

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