魔力医生

我是一名研究生，在做大鼠的胸主动脉免疫组化，测ICAM-1，应该表达在内皮细胞膜上，但是我发现做了几批片子，血管壁上总是黄乎乎的，内皮也有表达，我DAB显色2分多钟，是用1.5ML的双蒸水加ABC各一滴配的。怎样才能不让血管壁上着色呢？
（我一抗是博士德的，用中山的二步法试剂盒做的，一抗4度过夜，一抗浓度1：50）
请老师们指导一下，谢谢！