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求助:关于琼脂预包埋的切片问题。

没有用过琼脂,所以不知道它有什么特点。不过,我觉得你的标本在石蜡里的时间似乎太长了点,另外也不知道,你石蜡的缸温是设的多少度?温度太高组织也容易变硬脆的。
另外如果蜡块开裂,是不是你包埋后,没有让蜡块完全凉透、凝固就放入冰水里,这也容易导致蜡块出现裂口的。
还有一种杂志上报道的让蜡块内硬脆组织软化的办法,我试用过,效果还可以。就是把蜡块修切到需要的切面后,让组织面浸泡在这种液体里十来分钟,再切。配方,应该在笔记本上,我去查一下。

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《诊断病理学杂志》07年P474,《关于组织切片裂隙的处理》
用5mmol/L的盐酸盐液溶液处理蜡块,我试过,用它处理变硬脆的甲状腺,效果还不错。你可以查一下原文,试一试。
其实这种我已经配制了的盐酸盐液,正好可以解决前两天我发的“怎么解决切片出现裂隙”的帖子,我没有仔细看。
不过,版主给我建议的脱水程序,我试了一下,蜡块确实也有改进。

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组织块变硬,一般有两种情况,一是,进入二甲苯和浸蜡阶段的温度和时间太长,另一个就是脱水没有脱干净了。
从你说的情况来看,好像还是属于脱水的问题。不知道你包埋的时候,有这样的窟窿没有?如果包埋的时候没有,而是搁置了半天,切片时才出现,那可能还是脱水没有脱干净。进入二甲苯前水如果没有脱干净,后面的石蜡是进不了组织内的。包埋后,暴露在空气里时间稍长,组织内水分蒸发了,蜡块自然收缩变硬,周围出现窟窿了。你试一试纯酒精的时间延长半个小时到一个小时看看,当然要看你整个琼脂块的大小,如果小,时间短点,如果大,就稍微长点。
另外就是,包埋的时候,要趁组织块的蜡还是熔融状态时包,如果开始凝固了,那包出来也有气泡的。
因为不知道你的具体情况,有点隔靴擦痒的感觉,仅供参考哦。

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