santanuqiya

我们科遇到一个 卵巢 门细胞肿瘤（Ｌｅｙｄｉｇ细胞瘤）的 ，冰冻切片里面见到很多微小的红色棒状物，怀疑是Reinke结晶。 于是就开了 mallory三色染色（石蜡切片）， 我手头的参考书 都没有介绍这个染色的，于是上网查，以下是我采用的方法：
【1.1.3.Mallory氏三色染色法
[固   定] Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。甲醛固定的组织必须经过二次固定，以重铬酸钾—醋酸液处理15—60分钟。
[试   剂]
Lugol氏碘液
Mallory氏苯胺蓝液：
苯胺蓝               0.5g
橘黄G                2.0g
1%磷钨酸水溶液      100ml
配制：苯胺蓝以1%磷钨酸液50ml水浴加热溶解；橘黄G以1%磷钨酸液50ml加热溶解, 冷却后分别过滤后混合.
0.5%酸性复红水溶液
[操作步骤]
1．石蜡切片脱蜡至水。
2．Lugol氏碘液脱汞盐结晶，充分水洗。
3．明矾苏木精常规染色，分化，水洗。
4．0.5%酸性复红水溶液染1—5分钟。
5．自来水洗30秒钟或较长，直至纤维将近无色为止，蒸馏水洗。
6．Mallory氏苯胺蓝液染约20分钟（勿水洗）。
7．直接以95%酒精分化（镜下控制）。
8．无水酒精脱水，二甲苯透明，封固。
[结   果]   胶原纤维，网状纤维，盐基性颗粒呈深蓝色；软骨，粘液，淀粉样物质呈淡蓝色；纤维素，神经胶质原纤维酸性颗粒呈红色；红细胞，髓鞘呈橘黄至橙红色；细胞核呈紫蓝色。
】
但是还是很多疑问。
1、第一步到底需不需要染 苏木素？
2、这个结晶到底有多大（以门细胞肿瘤的胞核为参照）？最好有彩图（废了九牛二虎之力也没找到）
3、染完酸性品红，水洗到纤维无色（镜下观察），红细胞依然是异常鲜红，对判读造成很大干扰，怎么解决？
4、还有些网上的资料说PATH染色也有帮助，是跟染纤维那个方法一样染么？如果不一样，有老师知道到具体操作步骤么？结果如何判读？Reike结晶在PATH染色后是什么颜色？
很少发帖，不懂规矩之处请各位老师多多包涵和指教！

[ 本帖最后由 santanuqiya 于 2013-1-31 23:17 编辑 ]