首先我个人觉得需要有一定的光镜免疫组化的基础,通过光镜可以对抗原有个基本的了解具体应该考虑以下问题
1.固定液的选择:不知道你想表达的抗原对固定液的耐受程度如何?筛选原则是,PG固定液,PLP固定液等,光镜可以提供一些参考,原则是既要保存好抗原,又要尽可能保存超微结构。
2.包埋剂的选择:这里主要是要考虑聚合温度问题。光镜也可以提供参考。
3.抗体稀释度的选择:可以考虑产品提供的工作浓度上,适度加大浓度。
总之免疫电镜做起来非常麻烦,成功率的影响因素很多。我做过不少,但也不敢说很稳定。每一种不同的抗原都要摸方法。要有耐心