梅花

我最近做的冰冻细胞收缩，具体步骤：肺癌组织冰冻切片（没用电吹风吹）10%中性甲醛5秒—95%乙醇5秒—同常规HE染色至水洗，染哈瑞氏苏木素时间同常规，后面步骤也同常规。然后先后分别改用甲醇、95%酒精、AF、还有就是你介绍的固定液30秒—1分钟，这几种固定液染出来核有点灰，很郁闷，是否这几种含醇类的固定液染色要久些，如何才能做到不收缩，细胞核又清晰？

梅花

感谢王华老师的回复，我用10%中性甲醛固定时间延长到1分，收缩更明显，改用贴片后直接用甲醇或95%洒精固定30-60秒，细胞不收缩但是核染色稍灰，是固定时间不够还是染色时间太短？我准备按你说的试试，延长固定时间，用吸水纸吸干表面水，看效果如何。