guting2006

这张HE切片有什么问题？谢谢

guting2006

是切片质量，不好意思。是淋巴瘤的片子

guting2006

程老师啊，您好！这个片子是这样的，镜下看：无细胞核结构，哪怕染一秒，也一样，延长染色时间，延长分化时间也一样。起初以为是细胞收缩导致的，后调整脱水时间如下：70酒精3h，85酒精2h，95酒精1h，95酒精1h，100酒精1h，100酒精1h，100酒精45min，二甲苯30，二甲苯30，二甲苯20min，石蜡I为15min，石蜡II，III，IV各30min，温度60.，切片的烤片温度65半小时。无改善，后怀疑固定有问题，遂标本切开固定12小时，也如此。LN及淋巴瘤对细胞核比较要求高，颈清LN有时好有时坏。现怀疑标本离体时间太长而未及时固定，不知到各位老师以为如何？敬请指教。

[ 本帖最后由 guting2006 于 2012-1-9 17:10 编辑 ]

guting2006

shanghainese老师，您好！ 不好意思，那时候您讲的时候我肯定没有仔细听 。我们还是用的哈里氏。和这个有关？同一批标本有好有坏，主要是细胞核。冰冻和冰剩组织，冰冻组织一般较好，冰剩有时候好有时候不好。ＬＮ和淋巴瘤比较明显。本人知识浅薄，还望大家多多指教。谢谢

guting2006

引用:

原帖由 ChenRong 于 2012-1-9 22:45 发表
如果排除体外时间停留很长时间的话，那么你可以切的薄点，似乎是片子厚了，在我刚才点击图片放大观察后还是可以看到核里面的影子的。还有你的分化液盐酸酒精换新的，当盐酸酒精时间长了或是带入较多的水分大大降低分 ...

啊！陈老师，您看到了？我们好几个人都没看见 ，它另外一块做过冰冻的片子细胞核倒是很清楚。我照您的办法试过了，同样的蜡块，切1和２微米各一张，新配分化液，还是没有改善，不知道是技术不到家还是什么？

[ 本帖最后由 guting2006 于 2012-1-10 17:43 编辑 ]

guting2006

引用:

原帖由 ChenRong 于 2012-1-10 19:14 发表

这样看来，还是组织的固定关系了，通常情况下，冰冻取好后剩下的组织不直接固定的，需要等冰冻报告发出无误不需要重取材了在固定，（我科直接固定掉的 ），如果是不直接固定掉的话这段时间冰剩的组织细胞就要自溶 ...

嗯，现在就怀疑呢。不过我们科也是直接固定的啊 ，所以又好像不是固定的问题。我想请教一下陈老师您，做过冰冻的组织从冻头上直接卸下固定，会不会细胞自溶的慢了？而组织离体时间长的话，冰剩组织直接固定的同时细胞内部也在自溶，所以冰冻组织反而细胞核比冰剩组织清楚，会不会有这种可能？谢谢

guting2006

陈老师，我们没有切的这么薄，大概1cm。因为很多情况下，LN都不厚啊，切开后应该不存在固定不充分的情况。

guting2006

引用:

原帖由 逆风飞扬 于 2012-1-11 09:47 发表
从技术角度说首先标本脱水过了，其次蜡块冷冻过了，切时哈哈气，淋巴的组织要切薄

请教这位老师，您觉的哪里脱水过了？我的脱水步骤在前面写了，谢谢

guting2006

引用:

原帖由 shanghainese 于 2012-1-11 11:54 发表

Harris 苏木素液染色性很强,适用于脱钙的组织, 但是对淋巴组织, 淋巴瘤会染色过深。 你可以选择Mayer's 或 Gill's 苏木素液。

冰冻组织一般较好，冰剩有时候好有时候不好，是因为解冻没有解好产生了冰结晶 。

谢谢，shanghainese 老师。我得配个试试。冰剩没有冻过，也会有结晶？那怎么解冻不会产生冰结晶呢？

[ 本帖最后由 guting2006 于 2012-1-11 20:38 编辑 ]

guting2006

shanghainese老师，您好啊！您有可能前面没有看清楚，我说的“冰剩”是没有做过冰冻的组织。