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求助HE染色问题

求助HE染色问题

前段时间冰冻切片染色皮肤HE出现着蓝色的不规则影,请大家帮忙分析是什么原因?能否通过石蜡切片染色来克服啊?
同样时间染的正常的图2

[ 本帖最后由 tgq0 于 2009-9-20 11:13 编辑 ]
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感谢上面两位高手指教,我切的温度是-27以下,但是感觉表皮真皮层较厚,各层密度不均匀,容易卷片子,所以我有不少标本切的时候切速不一样,每切完一张,就把摇柄后退个15°左右,这样才相对克服切片不卷的问题,但是确实是存在切片厚薄不均的问题,所以我想做石蜡是不是会好点?

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我切的是8um,但是这样切有可能不只这个厚度,昨天我试着调了下时间,把苏木素的时间减少到5分钟,盐酸酒精分化4-6秒,感觉好一些,
  有人指教说可能是切片的时候片子上粘有其他的粹屑引起的,有可能么,我在染色前都用流水洗涤过的呀,
  请问会不会因为我的标本放在甲醛里时间稍长了,引起标本内部酸性物质过多?所以染色的时候非特异结合苏木素了?

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