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不要说一抗，二抗都有浓缩液

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原帖由 shanghainese 于 2011-6-26 00:02 发表
浓缩型的抗体(purified antibody)用1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin;BSA),0.09%叠氮钠的磷酸缓冲液(PBS)稀释成10~50ug/mL 浓度。在聚丙烯小管分装成10uL，放在负80度冻箱里长期保存。

瓶口要封好，时间长了液体会消失的

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原帖由 HHXX 于 2011-6-22 16:49 发表
我们科免疫组化有些一抗开的很少，用不完就过期了，想试下浓缩型抗体，会不会好点？

数量少用浓缩液不一定好，一你要定稀释比例，二用冰箱中的浓缩液，时间长了，活性降低，稀释比例又有变化，重新做，定稀释浓度，很繁的，如果还是按照以前的比例，对病人有不负责的嫌疑！故建议还是用工作液，可以1ml或1.5ml一定。

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原帖由 dingwei 于 2011-6-28 15:27 发表
浓缩型抗体一般不需要冷冻，只要4度冷藏就可以了。反复冻融对抗体不好（国内会有各种原因引起停电都会引起冻融）。

浓缩型抗体要冷冻，你放在冷藏中半年试试！工作液只要4度冷藏，一般放半年没有问题

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原帖由 dingwei 于 2011-6-27 16:54 发表


      我正好与这种观点相反，数量少才应该用浓缩液：即用型抗体保存时间长了，效价就会降低，你根本不知这抗体配好后在公司里放了多少时间，也不知道那天开始结果有差异了，而且有了差异还没有办法解决。而浓缩 ...

用量大的医院几乎都买浓缩液，只有用量少的医院才买工作液的。如果用量少的医院买浓缩液，过一段时间就调稀释浓度，消耗的原材料成本就会让病理科的主任无法承受的

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现在大医院对病理质量都非常重视，同一片子上都跟剃度组织（阴性，+，++，+++），而不是仅仅做一个病人的组织，这样一做，马上可以知道该即用型试剂活性是否达到要求，第二也能明确病人的组织病变程度了，浓缩液就要先专门做滴定，调比例，非常不适合小医院。

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原帖由 dingwei 于 2011-8-4 14:03 发表
我想你没有用过浓缩液，因为你并不知道浓缩液的稳定性。

用了很长时间了，现在上了自动染色仪，全部买浓缩液了

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原帖由 dingwei 于 2011-8-4 14:01 发表
我们的浓缩液在4度冰箱保存最长时间的是16年，是老教授从美国带回来的，效果一直很好，效价也基本没有降低，其中有一部分用低温冷冻保存，由于国内经常停电，效果反而没有冷藏的好。我们所有抗体都有在4度冰箱冷藏， ...

丁老师厉害了！免疫组化在九十年代初在中国的研究所、医学院开始由学科带头人做点试验，在医院的病理科运用也就十年左右，在医学院用时是从西德进口的，那时的辅料全是自己配的

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原帖由 flyaqmt 于 2011-8-4 14:26 发表

我同意丁老师的观点，现在免疫组化室间质内质控真正严格执行的没有几家

没有资格申请三甲的

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我知道，上海的几家大医院都在每一张（所有的）切片边上粘一张此抗体强阳性、阳性、弱阳性和阴性的对照组织，这四样组织放在同一蜡块中，切片，平时做了很多准备工作，非常不错的。
而且用自动染色仪后，效果比手工好多了，我是怀疑设备的辅料中有二抗增强剂的，手工用目前国内最好的二抗（葡萄串式多聚体二抗）效果也没有它强。