大家看看问题出在哪里?
按照 shanghainese 等的指导,我用漂片法做了脑组织的免疫组化的预试,我用4%的多聚甲醛固定后,然后用20%,30%的蔗糖脱水,之后切片。我是把切好的材料贴在玻片上然后放到冰箱冷冻备用。
我用了一抗的几个梯度来实验(200,400,800),并且用PBS做了一个阴性对照:结果对照的那个标本没有染上任何颜色,但是其他几个组织却出现整片染色,不过皮质的颜色还是略深,看上去就是出现了非特异性染色。
我预试的是caspase-8,结果核都着了色,我不知道问题出在哪里?我下一步该怎么实验来排除原因呢?非常着急,恳请大家多多指教!谢谢啦