新手妈妈

最近两次做的肾穿荧光，总是存在肾小球掉出来或是不见了的情况，不知道有哪位老师可以帮忙分析一下原因~
步骤如下：
3微米冰冻切片，一张片上切2张组织，放入-24度冰箱冷冻1-2小时，取出，吹风机冷风吹5-10分钟，蒸馏水洗3次，每次3-5分钟，加抗体，室温过夜，蒸馏水洗3次，每次3-5分钟，荧光显微镜观察。
一直都是这样做的，以前没有这种情况，最近2次掉片挺严重的，每次都有重做的项目，谢谢各位了~