tequila

大家好，我们实验室现在做周围神经的半薄切片，但是组织皱缩以及片子褶皱的问题严重，各位有何好的经验，请分享！谢谢！
我们目前采用的是：
2.5%戊二醛固定3-5天，锇酸固定2小时
50%酒精15分钟--70%酒精15分钟--90%酒精15分钟--1：1液（95%酒精：95%丙酮）15分钟--95%丙酮15分钟--100%丙酮1（10分钟）--100%丙酮2（10分钟）--100%丙酮3（10分钟）
丙酮：Epon812树脂 1：1（1小时）--丙酮：Epon812树脂 1：4（1小时）--纯Epon812树脂（2小时）
聚合：35度（16小时）--45度（8小时）--55度（16小时）--60度（48小时）
请各位指点（关于固定的时间，脱水的步骤等） :em02:  

tequila

非常感谢888！！
用火焰烘烤有利于片子展平是么？我回去试试看！不过，你说的蒸馏水是一滴很圆很圆的水珠么？我们也是用蒸馏水珠展片子，但是有的时候水珠不够鼓，成一滩，张力不够大，片子就展不平。还有，我们以前也用火焰烤干，片子上的细褶很多，影响观察，不知道是不是因为距离火焰太近温度过高加热不均匀。后来我们用60度烤箱烤干，慢一些，但似乎皱褶稍少一些，强点有限。不知道还有没有更好的办法。

tequila

还想请问一下，有没有经济实惠的粘片剂配置方法，可以让水珠在载玻片更鼓一些？

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最近我们查阅了一些书，发现组织皱缩（呈茄子型）主要是因为所取神经过粗锇酸固定这一步组织渗透不好造成的，我们将组织去下来之后纵行分成两半，再进行固定，效果就好多了，都是圆的。^_^b

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片子皱褶的问题，我们是用烤片机解决的。虽然花了7000，但是效果真得很不错，很少有摺，现在一个标本只要切几张片子就OK了。

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不过片子上水珠还是容易散，我们的片子都是用酸泡过然后烤干的，不脏，而且我也用纱布擦，但是还是一滴水就成一滩，希望各位老师帮忙指点一下看有没有什么好办法。谢谢咯!