DINGWEI

                                        染色
苏木素染色时间要根据染料的新旧、温度、切片的类型而定，一般为5－15分钟。经水略洗后，用盐酸酒精分化，分化程度必须用显微镜控制。分化水洗后，可用温水或自来水蓝化，并充分水洗（流水冲洗5分钟以上），以防盐酸残留导致切片褪色。我们不提倡使用碱性溶液（释氨水、肥皂水等）促蓝，尽管蓝化效果很好，但从实践的结果来看，用碱性溶液促蓝的切片不能长期保存，容易褪色。最后入伊红复染（5－20秒）。HE染色的关键在于深浅适度，对比鲜明，一般有经验的，肉眼就能判断，但偶而也会出现失误，所以用显微镜控制是最保险的方法。其关键的步骤在于苏木素染好后的分化及蓝化过程，在蓝化结束后，应在显微镜下观察细胞核着色是否合适，核结构是否清晰，胞浆内是否有残留的苏木素等等。染色理想的切片在显微镜下应是：细胞核与细胞浆应蓝红相映，鲜艳美丽；核浆对比明显，核膜及核染色质颗粒清晰可见。

dingwei

我没这方面的经验，不过HE切片我不赞成用中性福尔马林固定，我是用酸性福尔马林。 85 ML自来水，加 12 ML福尔马林，加 5 ML冰醋酸。固定后要水洗。

DINGWEI

没有的事，我做了很多实验，发现大多数抗体与中性与酸性无关，只有极少量的如：ER、PR等略有影响，而现在的试剂盒敏感性强，已经可以不计了，我查了文献，也有此报导，国外也不是全用中性固定，象英国免疫组化控制中心的规定，也不用中性。你可以试一下人家说的不一定是对的。