dingwei

排除没有加到一抗、检测系统和DAB。

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1、0。3%甲醇双氧水阻断20分钟。蒸馏水洗
2、EGTA水煮抗原修复25分钟后，快速拿出放入冷水冷却。
2、一抗、二抗、DAB加的量都很多，肯定覆盖住，没有干燥。
3、结果出来，7块组织边缘有几块都有不着色现象。几张片子都一样。

dingwei

是的

dingwei

排除此原因，其中有一张做同样的抗体，全部表达都是好的。

dingwei

同一个蜡块，和切片次序没有关系，和脱蜡也没有关系。

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引用:

原帖由 shanghainese 于 2012-6-19 12:19 发表
会不会是修复时修复液干了或是气泡引起的？

你基本上找到了原因。是抗原修复后，水温还没有冷到切片所需的温度就直接把片子拿出来，导致极少量的组织边缘迅速干燥，干燥部份的抗原迅速丢失。

dingwei

37度以下吧，在没有达到的情况下，可以直接加冷水至冷