常用HE试剂配制
一、苏木素(Harris)
配方:
苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml
蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g
HgO 0.5 g
先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。
二、依红
配方:
依红 20 g 蒸馏水 500 ml
将依红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%酒精1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的酒精 1:1-2倍稀释,加入1-2%冰醋酸。
此方法具有染色时间快,颜色鲜艳,不容易褪色,使用寿命长等特点。
三、 12%中性福尔马林(pH7.0)
配方:
甲醛 120 ml
NaH2PO4·H2O 4 g
Na2HPO4 13 g
蒸馏水 880 ml
四、 Bouin 固定液
配方:
饱和苦味酸 75 ml
甲醛 25 ml
冰醋酸 5 ml