正如shanghaineses老师所说的－－－－背景偏深有很多原因。除了内源性生物素和内源性过氧化物酶外，抗原热修复不当，一抗，二抗，Streptavidin-HRP 和DAB 不好等均可造成背景偏深。
你可以一个个排除：
内源性过氧化物酶通常存在于红细胞和坏死组织中，也就是说你在片子可以观察到红细胞显棕色，才可能有过氧化物酶的存在。。。。。。检测方法：修复后不加一抗和检测放大系统直接加DAB会出现背景。。。。
内源性生物素，是基于使用生物素系统才会出现的，检测方法：修复后不加一抗直接加检测系统中的酶后加DAB组织片显色。。。。。
你还要考虑一抗浓度过高、过孵育、孵育温度，DAB也一样。逐个排除。深究出现背景的可能你的免疫组化操作可以上一个台阶。
