shanghainese

病理科用的苏木素染液的配方有许多种，主要分为退行性和进行性染色两大类。用在免疫组化复染的苏木素，本人喜欢用进行性染色的苏木素，如Gill和Mayer，染完后只要水冲变蓝即可。退行性染色的苏木素，最普及的是Harris，它们也可用于免疫组化复染，但要用盐酸酒精分化和复蓝。

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1.  Mayer's 苏木素配方
   苏木素       1克
   蒸馏水       1，000毫升
   硫酸铝钾(铵) 50克
   碘酸钠       0.2克
   柠檬酸       1克
   水合氯醛     50克
将苏木素溶于蒸馏水内(需要时刻微热)，加入研细的明矾(硫酸铝钾或硫酸铝铵)，摇动助溶(需要时再加温)，明矾溶解后依次加入碘酸钠，柠檬酸和水合氯醛等试剂。配制后即可供用。
硫酸铝钾可换成硫酸铝铵。
2.   Gill's 苏木素配方
   苏木素       2克
   蒸馏水       730毫升
   硫酸铝       17.6克
   碘酸钠       0.2克
   乙二醇       250毫升
   冰醋酸       20毫升
   

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高山流云 ,您好！
我想您可能用的是Harris之类的(进行性染色)苏木素。您的染色步骤没有问题。问题可能出在苏木素陈旧了，失去了对细胞核的特异性染色以及染色液内有大量的氧化苏木素结晶(杂质)。一般我们每两周换一次苏木素。您不妨试一下新配对苏木素。我用Harris苏木素做免疫组化复染时，如果染10分钟，那一定要用盐酸酒精分化和复蓝(流水冲15至20分钟，必要时用温水加快复蓝)。如果只染1至5秒，就不用分化直接用水冲蓝，然后在显微镜下观察染色是否满意。如果不满意，还可以分化直至满意为止。
希望我的拙见对您的实验有所帮助。

shanghainese

如何复蓝？流水冲15至20分钟，必要时用温水<50度(加快复蓝)。