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请教各位BrdU免疫组化染色

请教各位BrdU免疫组化染色

您可换用 BD Biosciences 的 BrdU 免疫组化试剂盒。联系地址:
BD广州办事处
广州市东风中路410-412号
健力宝大厦1208室
510030, 广州, 广东省
Telephone 020-83486363
Facsimile 020-83486377

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另外,最好别做双标,吃力不讨好,除非你是高手。

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由于你用的是冰冻切片,可以做荧光免疫双标,选用反差大的荧光燃料。在同一部位拍照后,通过计算机将两张照片重新组合起来就可以了。

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“另外还有几个问题” 回答如下:
“我们做冰冻切片过程如下:经心脏灌注取脑,4%多聚甲醛(灌注液)固定1.5~2h,20~30%蔗糖(PBS配)沉底,开始切片。玻片晾干后铝箔纸包好,放-40℃保存待用。”
1.取脑后固定时间:4度C 过夜,少于24小时。2.蔗糖用PBS和蒸馏水配。
3.您用的冰冻切片法是漂片法,不需用玻片粘片。
4.切片厚度,如做普通冰冻或石蜡切片组化5~10微米即可。但漂片法切片厚度为20至40微米。
5.原位杂交作得不多,无法帮你们的忙。
6.用不用石蜡切,根据抗体来决定。有些抗体只能用于冰冻切片,有些抗体只能用于石蜡切片,有些抗体两者都能用。
另外,尽量不要做双标。
希望以上回答能让你们满意。如有不当之处,请多多原谅。

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