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一般说明书上抗体都有“建议”使用浓度或稀释度。但是有些公司的这个“建议”使用浓度或稀释度不准确。我的意见是您可以在“建议”使用浓度或稀释度的上下选几个不同的浓度或稀释度来测试。比如“建议”用1：100， 您可以选1：25， 1：50， 1：100， 1：200和1：400等几个稀释度来测试。
有的公司的产品要1：50稀释，有的要1：1，000稀释，这是很常见的事。要根据他们的要求来做。如果说明书没有提供稀释浓度，你可以直接与他们的技术服务部联系。如果中国代理商没有信息，您可以直接与外国公司联系。在说明书上都有他们的联系地址。

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这可能是边缘效应。注意一下，每次加的抗体量最好不要少于100微升并要覆盖过整个切片。