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Frozen Sections 冰冻切片
      Snap frozen fresh tissues in liquid nitrogen or isopentane pre-cooled in liquid nitrogen, embedded in OCT compound in cryomolds. Store frozen blocks at - 80 ºC.  新鲜组织包埋在装有OTC的冰冻包埋盒里，放入液氮或液氮预冷的异戊烷中速冻。冰冻快储存在-8 0º冻箱里。
      Cut 4-8 um thick cryostat sections and mount on superfrost plus slides or gelatin coated slides. Store slides at - 80 ºC until needed. 冰冻切片 4-8 微米，贴在superfrost plus 或涂有明胶的（防脱）载玻片上。片子储存在-8 0º冻箱里直到用时。
      Before staining, warm slides at room temperature for 30 minutes and fix in ice cold acetone for 5 minutes. Air dry for 30 minutes.  染色之前，切片在室温复温30分钟，冷丙酮固定5分钟。然后再空气干燥30分钟。
     Wash in PBS 磷酸缓冲液洗。

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染色
进3 ~ 0.3%双氧水消除内源过氧化物酶15分钟。PBS洗，再用血清37度封闭10 ~ 30分钟 （可省）。然后再加一抗，二抗等等，按常规的免疫组化来做。

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PBS冲洗，浸洗就可以了。

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引用:

原帖由 junyi4444 于 2008-12-5 18:59 发表
shanghainese老师

    我们科没有液氮和-8 0º冻箱，能做吗？只有莱卡的恒温冰冻切片机。
    我是把送来的术中冰冻组织直接取材，（不包埋，不放入液氮或液氮预冷的异戊烷中速冻）然后放在恒温冰冻切片机中 ...

可以这样做，但是容易产生冰结晶。
切5微米一点不薄。