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antigen decloaker是不是就是抗原修复液啊

antigen decloaker是不是就是抗原修复液啊

我最近跟着国外的一篇文献在做免疫组化,他用的是国外一家公司的antigen decloaker,我自己用的是中衫的柠檬酸盐缓冲液,现在作出来什么结果也没有,构成性表达的抗原也没有显示,不知道是哪个环节出了问题,请教各位怎么办,谢谢啦!

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antigen decloaker是不是就是抗原修复液啊

我用的抗体还没有商品化,是别人自己制备的单抗,操作步骤都是按照她们的文献来的,从高压修复条件,到一抗二抗浓度基本上都按照那篇文献来操作,由于做不出来,曾经试过很多其他方法,但是始终没有任何结果,真不知该怎么补救,还有,跟烤片的温度有没有关系啊,我一般都是70度,之前几个抗体都做的挺好,为什么这个出不来呢。

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70度15分钟,高压10kpa3分钟,一抗从0.7,1.4,2.8一直到11.2都试过,阳性对照也作不出来,阳性定位根据文献应该是在小肠粘膜上皮,类似于神经内分泌细胞定位的细胞浆内,我用过回肠,结肠都作不出来,是不是抗体有问题啊?

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antigen decloaker是不是就是抗原修复液啊

谢谢各位指点迷津,我先试试冰冻,同时二抗浓度相应提高,有问题在请教各位,谢了!

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我免疫组化用的是辣根过氧化物酶显色系统,之前要用3%过氧化氢阻断,虽说阻断的是内源性过氧化物酶,可是有人告诉我阻断也会影响抗原的免疫原性,所以做不出来可以试着不阻断,尝试了一下还是不行没有任何结果,就是有个疑问,真的阻断会影响抗原的免疫原性吗?

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冰冻也没做出来,实在想不出还有什么招了,一个月的时间就这么浪费掉了

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