fzxd888

最近本人查找了一些文献，却发现较多的文章上出现假象图片却发表了，感到非常震惊！比如说一些颗粒原本就是透电子的，在图片上却是电子致密颗粒，这不符合负染的基本原理。需要负染观察的物质，首先保证该物质不与染色液结合或者被染色，负染效果才会良好。不过，有一个问题需要引起大家注意的是，如果这些颗粒表面存在一些极易与染色液中重金属离子结合的物质，那么，这些颗粒在电镜中就表现为均匀的电子致密颗粒，但外周是没有空晕的，这就不是负染而是正染色。因此，在制作负染颗粒时必须考虑到颗粒自身或其表面是否存在与染色液极易结合的物质或成分。目前从方法上看，出现假象的原因大多由于负染时间比较长，或干燥时间比较长，造成了染色液浓缩成圆形颗粒状（一般带有一层明显的空晕），而个别研究者却把它当作了真实的样品形态，这是不应该的。为了避免这种假象的出现，建议科研人员在负染的时候要注意染色时间的把握（一般1分钟即可），千万不能让样品干燥（除非观察的样品是不透电子的），而且观察的时间不宜过长，一个样品观察时间控制在30分钟之内或更短些。同时做一个没有负染处理的样品作为对照（需要在高对比度模式下观察）。

[ 本帖最后由 fzxd888 于 2010-11-19 16:24 编辑 ]

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一般来说纳米材料是不透电子的，所以可以直接进行电镜观察，不需要负染处理的，比如碳颗粒、金颗粒等。

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在负染标本观察中，经常会在膜上看到非常小的透明小点，大小在3-5纳米，周围没有明显的黑圈，电子密度与周围支持膜的密度相当，且形态不太规则，与观察的负染颗粒相比，内部密度相对要小，透亮一些。希望引起大家的注意。

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在负染标本观察后，由于标本水分较多，其蒸发的水分对电镜镜筒的真空度造成很大的影响，负染标本观察后必须让电镜抽真空达4小时以上（24小时不关机的除外）才能关机。因为近段时间本人做的负染样本比较多，一次因为早点关机，第二天机器就罢工，真空好长时间才能抽上，而且反复多次抽电子枪室的真空。希望大家引起注意！