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免疫组化的目的当然就是为了检测存在于组织或细胞中的某种抗原，而一抗恰恰就是能与这种抗原特异性结合的抗体，为了放大检测信号，还需要二抗再特异性的与一抗结合，假设本来有一个抗原存在，这样会有很多一抗与这一抗原结合，而每一个一抗作为二抗的特异性抗原，又会结合很多二抗，就这样层层结合扩大，用酶标记的二抗又会与底物DAB发生显色反应，因而能够在显微镜下观察的到。