zhba0918

我做的大鼠睾丸的冷冻切片HE染色,但是细胞核不能着色显蓝是什么原因?
下面是我的染色参数,望各位大师指点不足!
   
     (8）蒸馏水                                          片刻
    （9）苏木素液染核                                    10—15分钟
    （10）自来水洗                                       片刻
    （11）1%盐酸酒精分化                                0.5—1分钟
    （12）流水冲洗                                       片刻至数小时
    （13）碳酸锂饱和水溶液反蓝                           1分钟
    （14）流水冲洗                                       15分钟至数小时
    （15）复染 0．5％伊红水溶液（对比染色）              2—5分钟
    （16）自来水洗（分化伊红）                            片刻

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我就是不分化，直接反蓝，还是不会出现蓝色。是不是我得染色液有问题？还是我固定剂有问题（4％多聚甲醛）？