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关于湿片封固的问题

摘自《临床技术操作规范•病理学分册》
1.石蜡切片HE染色(常规HE染色)
(1)二甲苯Ⅰ                  5~10min
(2)二甲苯Ⅱ                  5~10min
(3)无水乙醇Ⅰ                 1~3min
(4)无水乙醇Ⅱ                 1~3min
(5)95%乙醇Ⅰ                  1~3min
(6)95%乙醇Ⅱ                  1~3min
(7)80%乙醇                       1min
(8)蒸馏水                        1min
(9)苏木素液染色              5~10min
(10)流水洗去苏木素液             1min
(11)1%盐酸-乙醇               1~3s
(12)稍水洗                    1~2s  
(13)返蓝(用温水或1%氨水等) 5~10s  
(14)流水冲洗                  1~2min
(15)蒸馏水洗                  1~2min
(16)0.5%伊红液染色            1~3min
(17)蒸馏水稍洗                1~2s
(18)80%乙醇                   1~2s
(19)95%乙醇Ⅰ                 2~3min
(20)95%乙醇Ⅱ                 2~3min
(21)无水乙醇Ⅰ                3~5min
(22)无水乙醇Ⅱ                3~5min
(23)石炭酸-二甲苯             3~5min
(24)二甲苯Ⅰ                  3~5min
(25)二甲苯Ⅱ                  3~5min
(26)二甲苯Ⅲ                  3~5min
(27)中性树胶封固
注:①(12)和(13)项可省去,但(14)的冲水时间需延长至10~15min(细胞核显示更清晰)。
②(23)项可用无水乙醇代替;北方地区可省略。

5.载玻片自二甲苯中取出后,应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡,外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

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