阴性对照与阳性的是一样的，怎么办？

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1^# 大中小发表于 2007-4-9 19:30 显示全部帖子

我用SABC法，3%H2O2，30min；胰酶修复，30min；5%BSA，1h；一抗4度过夜；二抗、三抗各30min。
不知道是哪里出了问题，阴性对照与阳性片子总是一样的，真是急人，请大家帮帮忙，看是哪里出的问题，应该怎么改动，才好
先谢过了！

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2^# 大中小发表于 2007-4-10 08:06 显示全部帖子

好的，我一会试试。

提前封闭内源性生物素是什么意思，在哪一步之前封闭／?

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3^# 大中小发表于 2007-4-11 12:46 显示全部帖子

还是不太明白，我的是石蜡切片，girlly的意思是在修复前用5%BSA封闭吗？
还有如何能知道抗体是否污染？

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4^# 大中小发表于 2007-4-11 12:55 显示全部帖子

怎么发照片？

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5^# 大中小发表于 2007-4-11 13:32 显示全部帖子

一抗是兔抗人的，二抗是山羊抗兔的，我用试剂盒里的BSA封闭的，用正常山羊血清也封闭过，但感觉没有BSA好
另外我用5%H2O2的背景要清晰一些

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6^# 大中小发表于 2007-4-11 13:36 显示全部帖子

To fangdang：不加一抗和二抗只加酶的结果与全都加的结果是一样的！
你说的提前封闭内源性生物素是指将5%BSA用在修复之前吗？

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