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各位老师请教一个问题：
我在作免疫组化，标本是hela细胞。用的是ABC法，抗体浓度到了1：50，染色还是淡----公司的人说的。
可能哪里出了问题呢？

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hela就是阳性对照，biolegend公司把它当作质控。本来想染石蜡切片的，结果石蜡切片染不出，hela又很浅。
我使用-20度甲醇固定，所有孵育步骤均是37度孵箱，采用PBST洗涤，均是3次，每次5分钟。
对照用血清30分，一抗60分，二抗30分，ABC30分，DAB2--6分，对比染色5--10秒
请问，其中有哪些条件可以在改一下？
谢谢诸位老师！

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MICA/B  6D4 单克隆抗体 公司说可以做ihc

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多谢帮忙了。