liangshi007

各位老师好！
　　我采用新配制的ＥＡ５０染宫颈标本，染１５min，怎么老是着色很淡呢？
附ＥＡ５０配法
　　３％亮绿水溶液１０ml，加入２５０ml甲醇，再加磷钨酸２g（用２０ml水溶解后加入），７００ml９５％乙醇，２０％曙红Ｙ水溶液２０ml，最后加入冰醋酸２０ml。

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丁老师,我按您的那个配法做了,染液自然pH大约为5.2,红色和绿色都着色比较明显，但是发现有部分细胞胞浆既不着红色也不着绿色，呈无色透明状（胞浆轮廓清楚）、胞核结构清晰。另外我还做了个pH值较低的（4左右），发现着色得更深，但不着色的细胞始终着不上色。不知是不是配制EA50时加入原料的顺序问题还是新配制的染液需要成熟时间？
我的加样顺序是：加入亮绿后，依次加入甲醇、伊红、冰醋酸、磷钨酸（现配10%水溶液）、95%乙醇。

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角化前细胞，有时底层细胞绿色着色也比较淡，不知是不是原料的问题。我用的是sigma的亮绿，国药集团的磷钨酸。

liangshi007

不知道各位老师,能不能提供水溶性曙红Y、亮绿、磷钨酸的生产厂家