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『 免疫组化』
» 标记CD68分子不显色的问题
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标记CD68分子不显色的问题
panjero
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发表于 2007-2-1 12:43
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标记CD68分子不显色的问题
各位老师好:
我使用的是美国Lab vision公司生产的试剂,CD68 Ab-3(Clone KP1)。
无论修复还是不修复,即使是对阳性对照组织(扁桃体)进行标记都不显色。
说明书中注明使用Protease XXV(蛋白酶25??)进行修复,我不知道这是什么酶,但使用胰酶修复无效。
我不是病理专业,所以有些问题不懂,操作过程中使用双氧水不知道对结果有没有影响。
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发表于 2007-2-4 14:09
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操作流程
我也不知道我的操作有没有问题,但标记其他的抗原都成功了,只有cd68不行。
我用的是两步法,操作流程大体是这样的:烤片8h/脱蜡10min/清水冲洗/去离子水冲洗/双氧水浸泡10min/去离子水冲洗/胰酶消化5min-10min/微波修复20min或者省略此步/pbs液洗2*4min/加一抗常温2小时或者 37度1小时/pbs液洗2*4min/加二抗37度20min/pbs液洗2*4min/加DBA显色。
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