spingmao2005

我最近要做脊髓和背根神经节（DRG）的星形胶质细胞（和小胶质细胞）的GFAP(小胶质细胞ox-42)和TNF荧光双标。因为抗体比较少，所以很宝贵，如果做几次不出结果就要重新买抗体了。不知道大家能否给一些建议呢？谢谢哦
1.能否说说您觉得我做冰冻切片的详细步骤应该怎么做？
2.检索本论坛时，有的老师说：由于小胶质细胞ox-42是表面抗体，所以不要用多聚甲醛灌流和固定。这是否合适？ 如果可以固定，最好固定多长时间？
3.一抗、二抗孵育多长时间合适？
4.脊髓和背根神经节（DRG）冰冻切片的厚度是多少合适？是贴片好还是漂片好呢？

如果能够得到老师您的指导，是我无上的荣幸~再次感谢·@.@