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[讨论]免疫组化的基本问题

[讨论]免疫组化的基本问题

我是新手,诚心请教各位前辈!
我在做小鼠脑片的免疫组化。是冰冻切片。脑子是否应用4%多聚甲醛固定后,再用30%蔗糖磷酸液浸泡过夜后切片?还是可以直接切片后,用冷丙酮后固定?
我以前是直接切片,-20度冰箱保存,做之前先用冷丙酮固定,这样可以?

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[讨论]免疫组化的基本问题

谢谢丁老师!
可是有些人说必须用多聚甲醛前固定,冲去血块以减少背景色。是这样吗?

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shanghainese 好
我也看到过一些研究者做漂片,可受实验室限制,一直采用冰冻切片,而且居我所知,漂片的切片比较厚,8微米的可能不能做吧?我是新手,以后还要向你请教一些脑片方面的问题。

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[讨论]免疫组化的基本问题

shanghainese 大师好:
谢谢你的指点。我想问清楚些,切片切好后,马上用冷丙酮固定,然后放入-20度冰箱保存呢?还是吹干后,放入4度冰箱保存,做之前用冷丙酮固定?
这里还有个问题,我一直弄不懂,切片切好后,应放在-20度还是4度保存,能保存多久??望答复。

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[讨论]免疫组化的基本问题

衷心感谢老师们对我的指点!
我决定综合采用你们的方法。谢谢!

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