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[求助]丁老师等，请问冰冻切片中冰晶的问题？

好好

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1# 大 中 小 发表于 2003-8-10 23:34  显示全部帖子

[求助]丁老师等，请问冰冻切片中冰晶的问题？

近来做的小鼠脑片的冰冻切片中出现很多的“空洞”。这是否是由于没有用液氮等速冻至-70度，而是缓冻造成了“冰晶”？该如何避免？
急盼丁老师等给予解答！！！
做些片子真不容易，每一步都会出现各种问题！   :em16:  :em16:

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好好

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2# 大 中 小 发表于 2003-8-12 18:30  显示全部帖子

[求助]丁老师等，请问冰冻切片中冰晶的问题？

frankbj 好：
    我的小鼠是用生理盐水、多聚甲醛灌流固定后，多聚甲醛室温后固定2小时，20%蔗糖脱水（4度，过夜），然后冰冻切片。这样可能不需要用液氮速冻吧？
    我现在考虑可能是我固定脱水的时间不够，我打算延长后固定、脱水的时间试试看。不知我的想法对吗？

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