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免疫组化

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用tritc做二抗,一抗和二抗的稀释比都达到了最大(1:100,1:50)用山羊血亲分封闭30分钟,0.1%triton破膜。所标记的蛋白是在体内组成性表达的,可是总是抗不出来。所以想请教大家应该如何改进?(一抗用wester blot 做后没有问题)

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