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从目前的观察效果来看,培养细胞最好是原位固定后再行后续处理。由于胰酶消化下来的细胞,好多存在细胞膜损伤情况,对于超微结构研究影响较大,尤其是细胞器大部分受到影响,实验结果偏差较大!对于不重视超微结构而仅仅是观察某些纳米材料是否进入细胞内及存在部位的观察,胰酶消化可以接收。正确的方法就是:在培养细胞(贴壁细胞)时,将细胞培养在载玻片上,再将培养好的细胞的载玻片浸没在固定液內原位固定20min左右,再将载玻片浸没在冷的缓冲液中稍微冷却后,让细胞因冷刺激稍微收缩,与载玻片接触面粘附度减少,便于剥离(尤其是连接紧密上皮细胞),技术好的话,可以整片剥离下来,如果实在剥不下来,可以用锋利刀片协助刮下,这样的细胞大多保持原样,可以很好地区分细胞的游离面和基底面,以及细胞间的连接状况,而且细胞完整度很高,大家可以试试。