dingwei

免疫组化显色完成后，发现切片上有二区域不显色，本以为是抗体或DAB未加到，重新加一抗、二抗、DAB显色后还是没有颜色，请问大家有没有碰到类似的情况，是什么原因造成的。

xiaoniou777

我们也有过这样的情况，听主任分析可能与组织前期处理有关，比如固定、脱水…

dingwei

想不出原因：我用不脱蜡的片子、脱蜡后二甲苯不经酒精直接水洗等条件都做都过，就是无法重复做出此现象，也就是说与脱蜡过程没关系，阻断液一直是用以前配好的，也没问题，不知问题出在那。同一蜡块切的片子，其他都做得都是好的，再做也是好的，蜡块（组织前处理）也应该没问题。
是不是片子切好后碰到什么液体，把抗原破坏了？玻片上有二点强酸没洗干净把抗原破坏了？可能性也非常小。

老笨猫

也发生过这样的问题，后改用全自动免疫组化仪，有改善，但并未解决。个人觉得和组织前期处理有关系。

xiaoniou777

也就是说重做以后没有这种情况？

guting2006

这和脱蜡没关系，我们科也出现过这种情况，时好时坏，感觉和组织有关，致密的组织比较容易出现，还有就是抗原修复产生的气泡有关，个人感觉。

shanghainese

引用:

原帖由 guting2006 于 2011-8-19 21:09 发表
这和脱蜡没关系，我们科也出现过这种情况，时好时坏，感觉和组织有关，致密的组织比较容易出现，还有就是抗原修复产生的气泡有关，个人感觉。

dingwei

引用:

原帖由 xiaoniou777 于 2011-8-19 17:58 发表
也就是说重做以后没有这种情况？

出现白点的片子重做还是不着色。

xiaoniou777

那么我觉得如果是同一蜡块，别人做得好你做得不好可能是操作的问题，如果别人做的和你一样应该就是组织处理的问题。

dingwei

是的，关键问题是要推断操作问题出在那一步。