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关于乳腺肿瘤冰冻切片容易掉片的探讨

我的步骤几年基本差不多的,(刚开展病理科的时候用过一段时间放在酒精灯上烤),后来切片后直接放95%酒精固定10秒钟,拿出来水洗染苏木素2分钟,分化,当分化好在兰化时非常容易掉,常常是一整片飘在水里,如果是用防脱片那么会好很多,但是也会边上有反折的现象,我清楚是片子和玻片黏贴的不牢固产生的原因。
问题是我10几年下来只有现在这几个月(,5个月吧)会掉片,只要是乳腺的,用不是防脱片的玻片肯定掉片,那为何这几个月前从来不掉片?
95酒精一直用,玻片这家厂家一直用好几年了(世泰的),盐酸酒精也是一直是配这个浓度的0.5%,水洗的温度很适中,楼上问室温,5个月的时间跨度很大,温差很大,完全不是室温的缘故。
我记得在几年前,外院有拿来乳腺的标本,每次做都是会掉片,同时做的我院自己的乳腺标本重来不掉片,我那时就在考虑这个问题,会不会是他们路上20分钟耽搁时间了,组织发生自溶什么的问题而产生这个掉片的问题的呢,还是有其他原因。现在这几个月自己的乳腺标本也产生这个问题了,手术室就在我们楼上,很快就送到我们这里,不会有20分钟的时间,我就想不出还有什么原因了。
如果片子加热的话,是不会掉片的,掉片的问题是可以解决的,但是为何是要产生我上述的奇怪问题呢?很想弄明白。啰啰嗦嗦讲了一大堆。

[ 本帖最后由 ChenRong 于 2011-12-11 21:45 编辑 ]
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真难办啊!
如果问题还没解决,就说明问题很隐蔽,没有被正确的发现。
同一个公司的不同批次的产品也许也会不一样的,例如载玻片,酒精、盐酸、氨水、等等等等......
我没有遇到过乳腺冰冻掉片这样的问题,真不知道从什么方向思考啦!
每次遇到样的“刁钻”问题,我总有一种想自己亲自操作一下,亲自感觉一下的冲动......

[ 本帖最后由 王华 于 2011-12-12 17:00 编辑 ]

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昨晚在梦中对这个问题又想了想,觉得应该换个思路,放掉“与过去差不多”的想法,认真分析一下“脱片的这几个月”与过去相比有什么因素改变了,分析的越细致越容易接近问题核心。
唉!我这是“日有所思夜有所梦”啊!希望对陈老有一点点帮助!

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先汇报下两次的试验,居然没有掉片,比较晕了,没有什么改变。本来想用原来掉片的片子和固定液来做一次和大家那里收集来的方法来个对比,居然原来的方法不掉片了,很晕很晕,难道冰冻切片也上【中华病理技术网】?

我继续在做试验
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是用厂家的包埋剂?还是自己弄的包埋剂?我一直用开AAF固定,没有试过掉片的情况。而且用的也是普通的载玻片。会不会和包埋剂有关?

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换了不同的载玻片啦?

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我原来切髓核组织做免疫组化时掉片,后来总结的原因是切片后要先干燥1分钟再固定

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你们都用氨水兰化吗

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回复 1# 的帖子

我们曾经偶尔掉过几次,后来总结了几个可能的原因哦,不知是否一样哦,后来就没再掉过了,不知是否可以参考。1、载玻片脏2、固定时间短了。我们是先AF固定后进95%酒精。

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有时候遇到的一些问题还真是很诧异 我是来学习的 - - 顺便打酱油。。。

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