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求助.胃幽门螺杆菌配制方法

求助.胃幽门螺杆菌配制方法

以前配制的都不会使细胞核成蓝色

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甲苯胺蓝-索伦森磷酸缓冲液幽门弯曲菌染色法
固定:10%福尔马林。       
切片:石蜡切片4微米。
液体配制:
1.索伦森缓冲液phosphate buffer (Sorenson’s buffer)(25℃)
(1)储备液:
储备液A: 0.1M sodium dihyrogen orthophosphate (MW 156) 1.56g        of sodium dihydrogen orthophosphate in 100ml of distilled water.
储备液B: disodium hydrogen orthophosphate(MW 142) 1.415g of disodium hydrogen orthophosphate in 100ml of distlled water.
(2)工作液:pH6.81 储备液A: 24ml加储备液B: 26ml.
2.甲苯胺蓝-磷酸缓冲液pH6.8
索伦森磷酸缓冲液pH6.8                50ml
1%水溶性甲苯胺蓝                        1ml
染色步骤
1.        石蜡切片脱蜡至蒸馏水
2.        用磷酸缓冲甲苯胺蓝液染色20min。
3.        蒸馏水洗。
4.        脱水、透明、封固。
结果:在多种蓝色的背景中幽门弯曲菌呈深蓝色。

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多谢老师!

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