格言

请教，在做穿刺细胞的免疫组化时，怎样减少背景染色？

shanghainese

引用:

原帖由 格言 于 2011-3-8 16:18 发表
请教，在做穿刺细胞的免疫组化时，怎样减少背景染色？

那就要看你是怎样做的。

格言

穿刺的标本放在95%酒精内固定，待医生阅片完成后，根据需要再做免疫组化。
步骤如下：
1. 0.3%甲醇双氧水阻断20分钟。
2. 蒸馏水冲洗2次。
3. PBS冲洗3次。
4. 加一抗室温孵育60分钟。
5. PBS冲洗3次。
6. 加二抗15分钟。
7. PBS冲洗3次。
8. DAB显色。
9. 水洗，苏木素复染，脱水封片。

试剂是用迈新公司的。

lijie208239

穿刺标本 本来就是挤压很重的 很容易产生背景染色的

shanghainese

引用:

原帖由 格言 于 2011-3-24 15:36 发表
穿刺的标本放在95%酒精内固定，待医生阅片完成后，根据需要再做免疫组化。
步骤如下：
1. 0.3%甲醇双氧水阻断20分钟。
2. 蒸馏水冲洗2次。
3. PBS冲洗3次。
4. 加一抗室温孵育60分钟。
5. PBS冲洗3次。
6. 加 ...

用酒精内固定并不是好的选择，不妨试一试丙酮固定。在一抗里加上一点BSA 有助降低背景。