九日

. 取材
送检的新鲜组织避免遇水, 取材器械要擦干, 如组织本身带水较多, 就用滤纸把水吸干, 其目的在于防止切片产生空洞、冰晶等现象。取材中也应避免不必要的脂肪组织附着%尤其是淋巴结组织∋, 以保证切片完整、无皱囊。
! 速冻
冰冻切片预冷很重要, 一般要提前! 小时开机, 预冷温度控制在一!􀀁 ℃ 一!1 ℃ 较为合适。冷冻台最好不要取出, 组织直接冻在切片机内操作, 如果冷冻台需要从机内取出, 则要迅速将组织冻上, 并立即置人切片机内, 这样可以使组织速冻, 减少冰晶形成, 使切片薄且平展, 从而获得满意的效果。
∗ 温度
冰冻切片的温度要适宜, 温度过低会导致组织块过硬, 切片碎裂( 反之, 温度过高, 组织块硬度不够, 又切不成片。所以要想获得一张既薄又完整的切片, 控制的最佳温度是相当重要的。我们的经验是肝、脾、肾、肌肉等组织, 最佳温度为一! 􀀂 ℃ 2一! ! ℃ ( 脑组织过嫩, 温度不宜过低, 应为一1 ℃ 一.􀀂 ℃ ( 对脂肪类组织温度应更低一些, 为一−􀀁 ℃ 一􀀁 ℃ ( 淋巴结、甲状腺、皮肤等组织以一.1 ℃ 、一! 􀀂℃ 为宜( 乳房肿块、软组织肿瘤温度应控制在一! 􀀂 ℃ 一! 􀀁℃ 。
− 包埋
用合成胶水或3 45 作组织块假包埋剂, 只要温度掌握适宜、切片刀锋锐利, 就能切出薄而均匀、无划痕、厚度约− 一0 卜6的切片。合成胶水和345 都具有粘稠性和渗透性, 既能粘附在冰冻头上的螺旋缝内, 又能填塞于组织与冰冻头之间的缝隙内, 从而将组织牢固地固定在冰冻头上。另外, 冰冻头不宜预先冷冻, 因为温差太大, 包埋剂不能与冰冻头牢固结合而脱落, 无法制片。
􀀁 切片、固定
切片时手摇轮用力要均匀, 防卷板与切片刀锋之间的距离要调节适当, 这是获得平整切片的关键。附贴切片动作要轻巧、快, 裱片后立即在电炉上稍烘几秒, 使切片与载玻片牢固粘连,然后用7􀀁 乙醇固定数秒使细胞适当收缩, 易于染色, 效果接近于石蜡切片。这两步费时不多, 却会收到很好的效果。
0 染色
固定后的切片无需水洗, 直接人苏木素%− 􀀂 ℃ ∋∗ 秒钟%苏木素含量加到! ∋。水洗、盐酸酒精分化%一般可省略∋、温水蓝化8 伊红浸泡三次。7􀀂 酒精浸泡8 7􀀁 酒精浸泡、无水酒精浸泡。二甲苯浸泡两次、中性树胶固定。全过程约需巧分钟。必须注意淋巴结组织的冰冻切片应过染再分化, 这样染色效果更好。
此文转载于《石河子医学院学报》
作者：梁伟华, 郑玉琴, 王毅训, 郑兴征, 杨安强, 陶林

[ 本帖最后由 九日 于 2011-4-20 09:33 编辑 ]