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免疫组织化学的标准化

免疫组织化学的标准化

[这个贴子最后由yinyrh在 2002/10/25 11:12am 编辑]

    免疫组化(IHC)技术是上世纪七十年代开始的一种检测组织细胞内特定抗原成分的有效方法之一。自从免疫组化技术应用于临床病理诊断以来,据文献报导,一半以上的疑难病例都可以用免疫组化检测方法获得正确诊断[1]。随着单克隆抗体技术、抗原修复技术、分子生物学技术的飞速发展,90年代以来免疫组化技术已广泛应用石蜡切片回顾性研究。并且随着一些肿瘤基因、抗肿瘤基因产物的发现,目前免疫组化技术已应用到恶性肿瘤患者预后和恶性肿瘤治疗的研究中 [2]。但是,传统手工免疫组化实验存在可复性、一致性较差的缺点,在一定程度上阻碍了免疫组化技术在临床病理学上的应用。目前发达国家提出了标准化免疫组化概念,包括试剂的标准化、操作标准化和结果判断标准化。
    请各位老师专家提供有关标准化的文献及有关资料!

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传统手工免疫组化实验存在可复性、一致性较差?是谁说的?标准化免疫组化:包括试剂的标准化、操作标准化和结果判断标准化难道不是传统手工免疫组化?传统手工免疫组化难道就没有标准化?什么是标准化?用他们配好的贵几倍的试剂、买他们设备就是标准化?这些都是胡说八道,都是一些拿了厂家钱没有职业道德的人说的。机器是死的,机器不可能做的比人好,因为我们各种条件是经常在变的,就象HE切片自动染色机染出的片子,怎么也没有手工染得好,同一天同样的时间,同样的条件,染出的片子色彩差异很大。免疫组化也同样,切片固定时间不一样,组织不一样,厚薄不一样,试剂新旧不一样,抗原表达强度不一样,都按一样的时间显色,会有最好的结果吗?机器只是按你给的时间死板地去完成,只要机器能做出来的,那你也一定能做出来,而且应该比机器做得更好。
        真正的标准化我认为只有二个,一个是认真按说明书去做,二是设立阳性对照(需这只抗体强阳性和弱阳性二种标本做成的对照),每次做都应该有阳性对照。只要阳性对照强与弱二种组织都做好了,那你的操作就是正确的规范的。这里最大的问题就是如何把你的阳性片做对了,如果你一直操作都是错误的,那你的阳性片也一定是错误的。所以我们操作要正规,要避免随意性,对新到抗体,都应该做一个梯度的条件测试。如果这些都有做好了,不可能出现所谓的重复性差的问题,如果重复性差,这个技术早就不存在了。免疫组化重复差往往出现在组织处理不同、抗原丢失、抗体稀释比降低等不可预知的问题上,而不是操作本身。
       至于说结果判断标准化,这的确很重要,同样的标准,每个人尺寸还是不一样,就我们科标准一样各人打出来的结果还是有差异。靠肉眼的东西要大家说出一样的结果的确也难,这就是有一个业务提高和统一标准的问题。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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