fighting

请教各位老师：
           我最近在做大鼠大脑石蜡切片的免疫组化（4um厚），结果老掉片。
    具体步骤是：干净的玻片用多聚赖氨酸包被后入烤箱1小时烘干，展片、捞片后入58度烤箱过夜烤干，结果掉片。我又加大多聚赖氨酸浓度（1：6、1:3),仍掉片。甚至用未稀释的多聚赖氨酸，还是掉片。心都碎了！
    两个月前用同样的方法做的时候没有出现这个问题。现在老掉片，我找不到原因。假期正好实验室的老师都不在，只能自己摸索。各位老师有什么建议？小女子不甚感激！！！

bbfwind

　建议你用４％甲醛明胶来处理玻片呀.

fighting

引用:

原帖由 bbfwind 于 2008-8-5 16:09 发表
　建议你用４％甲醛明胶来处理玻片呀.

谢谢bbfwind！但是我觉得不是粘片剂的问题，有没有其他的建议呢？

wangze8229

58度烤片不用过夜的，一般30分钟到一小时就可以，只要切片上的蜡溶了就可以。

www123

脑组织易掉片，建议用滤纸吸一下.

fangdang

1。如果预处理不好（固定、脱水）脑组织磷脂含量高，不管是多聚赖氨酸还是APES对脂质的黏附性都不是太好！你可以试用阳离子玻片！
2。改善预处理方式。

ljs

多聚赖过期没？我用了原液5μL一张玻片。你可以试试

jiaguotao

你所谓的“干净”玻片，不是真正的干净！只有处理好的载玻片才能涂上多聚赖氨酸！才能称为免疫组化的专用载玻片呢！请教丁伟老师吧！我就不敢造次了！

冰雪

脑组织一定要进行灌注处理，预处理不好（固定、脱水），肯定脱片，这是我们早在十年前就解决掉的问题。