kuosheng_ksia

我需要检测Ts,TP,MDR3,p-gp等耐药相关蛋白在肿瘤细胞株(非耐药株)中表达情况,前两者主要定位于胞浆,后两者定位于胞膜\胞浆;前面提到的4%多聚甲醛固定参考了<抗体技术指南>和师兄意见.

期待版主详细介绍下抗原定位检测与固定剂选择的关系.........

shanghainese

引用:

原帖由 bagelo 于 2008-3-7 09:28 发表
可以用酶修复啊，胰酶和胃酶都可以。细胞爬片不象石蜡片，石蜡片在制片的过程中对抗原有一定的影响，需要通过修复充分暴露抗原，细胞爬片不用那么剧烈的热修复，你试试酶修复吧。如果是丙酮固定则不需要修复，甲醛和 ...

shanghainese

引用:

原帖由 kuosheng_ksia 于 2008-3-7 11:13 发表
我需要检测Ts,TP,MDR3,p-gp等耐药相关蛋白在肿瘤细胞株(非耐药株)中表达情况,前两者主要定位于胞浆,后两者定位于胞膜\胞浆;前面提到的4%多聚甲醛固定参考了和师兄意见.

期待版主详细介绍下抗原定位检测与固定剂选 ...

不知道您所用的一抗是否可以用在多聚甲醛固定的细胞上。请您仔细看一下说明书。

kuosheng_ksia

一抗是科里病理室用来做组织化学的,说明书上说"适用于福尔马林固定的石蜡切片和冰冻切片",老板的让我直接拿来做细胞化学以节省经费,迈新的产品.

kuosheng_ksia

丙酮固定是用甲醇和丙酮1:1混合液?做实验没多久,很多不懂

shanghainese

丙酮固定是用纯丙酮。

kuosheng_ksia

谢谢指点

加冰地可乐

要是细胞学免疫组化诊断可以出现方案的话，这样将会对治疗有很大很好的帮助，顶～！！

guoyk

直接用丙酮固定就不用抗原修复和双氧水封闭了，我们平时做免疫组化要热修复的原理就是因为组织经过甲醛固定后，产生蛋白交联，需要高压把其打开，以暴露抗原决定簇，细胞学没有必要经过甲醛。

冰雪

引用:

原帖由 shanghainese 于 2008-3-7 11:43 发表
丙酮固定是用纯丙酮。

我个人感觉用丙酮固定，有时细胞收缩得很厉害、细胞变形。